Real Academia Nacional de Medicina
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Sesión del día 25 de Octubre del 2005 - Córnea artificial. Cultivos celulares e ingeniería tisular

"Córnea artificial. Cultivos celulares e ingeniería tisular",

Antonio Campos Muñoz

 

 

 

 

por el Excmo. Sr. D. Antonio Campos Muñoz.

Catedrático de Histología
Universidad de Granada

Académico de Número
Real Academia Nacional de Medicina

Sillón nº 38 - Histología -

 

RESUMEN

La córnea, túnica transparente de la región anterior del globo ocular, constituye en este momento, a causa de la escasez de donantes, un órgano diana en la investigación por ingeniería tisular. En el presente trabajo exponemos nuestra experiencia en la construcción de un sustituto completo de cornea utilizando cultivos celulares y distintos protocolos de ingeniería tisular. La metodología consiste en aislar keratocitos, células epiteliales y células endoteliales –las tres poblaciones existentes en la córnea- a partir respectivamente de estroma corneal denudado, explantes del limbo corneal y de endotelio desprendido enzimaticamente. Las células fueron cultivadas en medios específicos y evaluadas en su viabilidad mediante microscopia electrónica analítica. El constructo completo de córnea se configuro, de un modo semejante a como esta estructurada la histología ortotípica de la córnea, tras el depósito sucesivo de células endoteliales, keratocitos inmersos en gel de fibrina y células epiteliales viables.

ABSTRACT

The cornea, the fibrous transparent layer of the eye ball, is becoming a target of tissue engineering research because of the scarcity of donors. We report our experience in developing a mechanism to build a full-thickness corneal substitute using cell culture and protocols of tissue engineering. Isolation of keratocytes, epithelial and endothelial cells was accomplished by culturing denuded corneal stroma, limbal explant and enzymatically detached endothelium.

Each type of cell was cultured in selective medium. Microanalytical quality control of cell viability was carried out. A multilayered cornea construct was built by sequential deposition of endothelium, keratinocytes immersed a gel of human fibrin and epithelium in a manner that reproduce the normal histological structure.