Sesión del día 8 de Abril del 2008
"Aislamiento y viabilidad de las células endoteliales humanas en Ingeniería Tisular"
por el Excmo. Sr. D. Antonio Campos Muñoz,
Académico de Número.
"Aislamiento y viabilidad de las células endoteliales humanas en Ingeniería Tisular"
por el Excmo. Sr. D. Antonio Campos Muñoz.
Catedrático de Histología
Universidad de Granada
Académico de Número
Real Academia Nacional de Medicina
Sillón nº 38 - Histología -
RESUMEN
La construcción de vasos artificiales por ingeniería tisular depende del uso de células endoteliales en cultivo con adecuada viabilidad y funcionalidad. En el presente trabajo se realiza un estudio preliminar sobre la viabilidad y la actividad secretora de PGI 2 en cultivos de células endoteliales procedentes de vena del cordón umbilical para identificar el pase mas apropiado para su utilización en los protocolos de ingeniería tisular. La viabilidad celular se determinó por microscopia electrónica analítica de Rayos X evaluando las concentraciones iónicas intracelulares. La liberación de PGI 2 en sobrenadante se determinó por radioinmunoensayo. Los resultados demostraron que la viabilidad de terminada por el índice K/ Na fue mas elevada en el tercer subcultivo mientras que la liberación de PGI 2 fue mas elevada en los dos primeros. Estos datos sugieren que las células correspondientes al segundo subcultivo muestran el mejor índice viabilidad/ funcionalidad y que por tanto podrían utilizarse con eficacia en los protocolos de ingeniería tisular
ABSTRACT
Construction of human blood vessels by tissue engineering is strongly dependent on the use of viable and fully functional cultured endothelial cells (ECs). In this work, we have determined in a preliminary study both cell viability and PGI 2 activity in primary cell cultures of human umbilical vein ECs, to identify the specific cell passage that is more appropriate to be used in tissue engineering protocols. Cell viability was determined by quantification of the intracellular concentration of several ions by electron probe X-ray microanalysis, whereas PGI 2 release was quantified by radioimmunoassay. The results of our analyses demonstrate that the K/Na ratio was different for each cell passage, suggesting that the highest cell viability corresponds to the third passage. In contrast, PGI 2 production was higher at the first two cell passages, with a significant decrease at the third passage. These data suggest that cells corresponding to the second cell passage show the best ratio viability/functionality and should therefore be used for tissue engineering protocols.